協同乳業、ビフィズス菌LKM５１２がイヌの腸内に生きて到達し腸管内で増殖することを確認

協同乳業、おおにし動物病院（長野県安曇野市）との共同研究で
ビフィズス菌LKM５１２がイヌの腸内に生きて到達、腸管内で増殖することを確認
ヒトとペットで共用できるビフィズス菌は初


　メイトーブランドの協同乳業株式会社（本社：東京・中央区／社長：尾崎玲（◇））は、おおにし動物病院（長野県安曇野市）と共同で、ビフィズス菌LKM５１２がイヌの腸内でも生きて到達し、腸管内で増殖することを明らかにしました。当社はこれまでの研究で、ビフィズス菌LKM５１２がヒトのアトピー性皮膚炎軽減に有効であることや、マウスの寿命を伸ばすことを確認してきましたが、本研究結果はLKM５１２がイヌにとってのプロバイオティクスになり得る可能性を示唆しています。また、本研究結果は、オランダのジャーナルBeneficial　Microbeに掲載されました。

　◇社長名の正式表記は添付の関連資料を参照


【研究の目的】
　イヌは肉食獣のため、ヒトと比べ、胃内環境は食物存在下でも強い酸性を示し、食物の胃内滞在時間も長い。そのためイヌの胃は、プロバイオティクスにとって厳しい条件で、生きて届いたという報告例は非常に少ない。ヒトにおいて十分な耐酸性を示すプロバイオティクスビフィズス菌LKM５１２がイヌにおいても（１）大腸まで生菌で到達することができるか、（２）ヒト同様に腸管内で増殖が認められるかを確認することを目的に検証した。


【方法】
　１歳〜１１歳、体重４kgのトイプードルから２０kgの秋田犬までのペットとして飼育されているイヌを対象に、粉末状のLKM５１２を１日１包１g（約１００億個）食餌に混ぜて１４日間投与した。図１のスケジュールで糞便を採取し、ビフィズス菌のみが生育できる培地を用いた培養法で分離した菌の集落（コロニー）を、種（B．animalis　subsp．lactis）を特定するPCR法（＊１）、さらに菌株レベルの識別ができるRAPD−PCR法とrep−PCR（＊２）を用いて、糞便中で生存しているLKM５１２の確認を行った。またq−PCR法（＊３）によりLKM５１２が属するラクティス菌（Bifidobacterium　animalis　subsp．lactis、ビフィズス菌の一種）を計測した。腸内菌叢の変化は次世代型シーケンサー（＊４）を用い解析した。

　・＊１　PCR：特異的な遺伝子配列増幅法。本試験ではLKM５１２が属するラクティス菌に特異的な遺伝子配列をターゲットにした菌種レベルでの判別を実施した。
　・＊２　RAPD−PCRとrep−PCR：DNAの多型を解析する手法で株レベルの判別ができる。
　・＊３　q−PCR：特異的な遺伝子配列をターゲットにした定量が可能なPCR。種レベルでの菌数測定ができる。
　・＊４　次世代型シーケンサー：１度に大量のDNA配列を決定できる解析装置。腸内細菌構成の網羅的な解析ができる最新の手法である。

　※図１は添付の関連資料を参照


【結果および考察】
　ビフィズス菌選択培地に生育したコロニー（図２）からDNAを抽出し各種PCR法で解析した結果（図３）、全個体の糞便中にLKM５１２の生菌が検出され、その数は１日の投与量を上回っており、大腸へ生菌で到達するだけでなく腸管内で増殖することが確認された（図４）。同様に、遺伝子レベルでも糞便中のビフィズス菌（B．animalis　subsp．lactis）が１日の投与量を上回ることが確認され（図４）た。腸内菌叢の網羅的解析では、投与期間中にBifidobacterium属（ビフィズス菌）の菌数の増加が確認されたが、それ以外の主要な菌では、腸内菌叢の変化は認められなかった。
　幅広い年齢と犬種の糞便において生きたLKM５１２が検出され、イヌの過酷な胃内の環境に耐え、腸管内で増殖する能力を有することが確認された。これはLKM５１２がイヌのプロバイオティクスとして有用であることを示している。LKM５１２のこれまでに確認されている保健効果、例えば、マウスでの寿命伸長（＊４）やヒトでの便通改善（＊５）、アトピー症状の緩和（＊６）といった保健効果がイヌでも発揮される可能性が期待される。また、ヒトとイヌ両者の腸管内で増殖が認められたプロバイオティクスはLKM５１２が初めてである。

　我々は、飼い主とペットが共通のプロバイオティクスLKM５１２を食べることで、より強い絆で結ばれた充実した生活が過ごせるよう、今後も研究を続けていく予定です。

　・＊４　PLoS　ONE　６：e２３６５２（２０１１），Sci．Rep．４：４５４８（２０１４）．
　・＊５　腸内細菌学雑誌１４：９７−１０２（２０００）
　・＊６　Ann　Allergy　Asthma　Immunol．１１３：２０９−２１６（２０１４）．

　※図２〜４は添付の関連資料を参照


　論文：A．Nakamura，Y．Ohnishi，K．Shiratori，and　M．Matsumoto“Evaluation　of　viability　Bifidobacterium　animalis　subsp．lactis　LKM５１２　in　dogs”

　日本語タイトル：ビフィズス菌LKM５１２のイヌにおける生存性の評価


　■協同乳業株式会社ホームページ：http://www.meito.co.jp
　■ビフィズス菌LKM５１２オリジナルサイト：http://www.lkm512.com/